适用范围：适用于快速提取多糖多酚植物样本和真菌的总RNA。

产品储存：室温储存和运输，12个月不影响使用效果。

储存事项：

1. 不合适的储存于低温(4℃或者－20℃)会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下(15℃－25℃)进行。

2. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

产品介绍：本试剂盒适用于快速提取普通植物、简单多糖多酚植物和真菌的总RNA。采用独家研发基因组DNA清除/RNA吸附通用柱技术，配合特殊试剂配方不需DNA酶消化，可高效清除gDNA残留，得到的RNA无显著DNA残留，可直接用于下游反转录荧光定量PCR或者高通量测序建库等试验。

产品特点：

1. 完全不使用有毒的苯酚、氯仿和β-巯基乙醇等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。

2. 操作简单，快速便捷，单个样品操作一般可在15分钟内完成。

3. 独家成功研发的基因组DNA清除柱和/RNA吸附柱技术，可以有效清除gDNA残留，得到的RNA纯度极高，OD260/OD280典型的比值可高达2.1～2.2(高纯度RNA比值一般在2.2左右)。

4. 世界领先适应性极其广泛，可以提取包括棉花、月季、拟南芥、水稻、烟草、杨树等数百种国内外试剂盒提取失败的样品。

5. 本试剂盒一般不需要DNase消化，提取的高纯度RNA可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR、高通量测序建库等下游实验。

注意事项：

1. 所有的离心步骤均可在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的台式离心机。

2. 需要自备乙醇、研钵(可选)。

3. 裂解液RPA和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时请穿实验服并佩戴一次性乳胶手套，实验操作中应避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水及时冲洗。

4. 本试剂盒可去除体系中大部分的DNA残留，纯化获得的RNA通常无需使用DNase I处理即可用于下游实验操作。不同样本核酸含量相差较大，如果下游实验对痕量DNA十分敏感，可以使用DNase I进一步清除DNA污染。

操作步骤(实验前请先阅读注意事项)：

提示：第一次使用前，请先按照漂洗液RW瓶标签指示加入指定量无水乙醇！

1. 取600μL裂解液RPA，转入1.5mL离心管中备用。

2. 液氮中研磨适量植物/真菌组织成细粉后，取50mg-100mg细粉转入上述装有裂解液RPA的离心管，立即剧烈涡旋震荡30sec，使样本与裂解液充分混合裂解完全，13,000 rpm离心5min，立即进行后续操作。

注：样品处理量可根据具体情况增减，例如果实类如水分多可以适当加大处理量。

3. 取裂解物上清约500μL至DNA清除/RNA吸附通用柱(已放入收集管中，以下简称通用柱)中，13,000rpm离心30sec，弃掉通用柱，保留收集管中的滤液(RNA在滤液中)。

注：上清体积可根据实际情况做出相应调整。

4. 向收集管中加入0.5倍滤液体积的无水乙醇(约250μL，根据上清实际情况调整)，移液器吹打混匀。

注：若加醇后出现浑浊或有絮状物产生，属正常现象，可将混合液(包括絮状物)都加入通用柱中继续进行后续操作。

5. 立即将上述混合液转移至一个新的通用柱内(已放入收集管中)，静置1min，13,000 rpm离心30sec，弃滤液，将通用柱放回收集管。

注：吸附柱容积为750μL，若混合液超过该体积请分多次进行上柱。

6. 向通用柱中加入700μL去蛋白液RW1，室温放置1min，13,000rpm离心30sec，弃滤液。

7. 向通用柱中加入500μL漂洗液RW(使用前请检查是否已加入无水乙醇!)，13,000rpm离心30sec，弃滤液。

8. 重复步骤7一遍。

9. 将通用柱放回收集管中，13,000rpm离心2min。

10. 将通用柱转移至新的1.5mL离心管中，向吸附柱膜中央悬空滴加30-50μL的RNase-free Water，静置1min，13,000rpm离心1min。

注：洗脱体积建议不少于30μL，体积过小会影响核酸回收效率。

注：可以帮助提高RNA产物浓度的操作：RNase-free Water于90℃预热；将第一次洗脱液重新加入吸附柱进行洗脱。

11. 提取的高纯度RNA可直接用于下游相关实验或储存于-85℃至-65℃保存。

产品说明书.pdf