适用范围：适合动物组织、植物材料、细胞、病毒、液体样本、微生物等样本。

产品储存：常温运输，4℃避光保存，室温保存12个月，4℃保存24个月。

产品介绍：

    本制品是基于异硫氰酸胍和酚，具有极强的裂解能力，可在短时间内裂解细胞和组织样本，保证RNA的完整性。本产品广泛适用于培养细胞、动物组织、微生物，以及次生代谢较少的植物组织，如幼苗、幼叶等。样品在本制品中能够充分被裂解，在加入氯仿离心后，溶液会形成上清层、中间层和有机层(鲜红色下层)，RNA分布在上层水相中，收集上清层后，经异丙醇沉淀便可以回收得到Total RNA。

    本制品是广谱型总RNA提取试剂，实验操作快速方便，颜色鲜明，便于分层。本试剂适用范围广泛，可以从动物组织、植物材料、细胞、病毒、微生物等样品中提取总RNA。该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×10⁶)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>10⁷)均有较好的分离效果。

    本制品提取的总RNA完整性好，基本无蛋白和DNA污染，能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如从大鼠肝脏抽提的RNA进行琼脂糖凝胶电泳(注：如果是普通琼脂糖凝胶电泳，28S的位置大约在2kb，18S大约在1kb的位置，不同浓度的凝胶位置变化较大)，并用溴化乙啶染色，可见许多介于7kb和15kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分)，两条优势核糖体~5 kb(28S)和~2 kb(18S)，低分子量RNA介于0.1 kb和0.3 kb之间(tRNA，5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值能达到1.8以上，提取的RNA纯度高完整性好，可用于下游各种分子生物学常规实验，如RT-PCR、qRT-PCR、Northern-Blot、Dot-Blot、体外翻译等。

注意事项：

1. 本制品中含有苯酚，具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。使用本制品时应穿戴防护用品(如防护服装、手套、眼罩、面罩等)。如不慎接触，应立即用大量的清水冲洗，严重的请立即前往医院治疗。

2. 样品用本制品匀浆后，如果不即刻加入氯仿之前，置于-70°C下可放置一个月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀，2-8°C可以保存一周，-20°C条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短，容易降解，建议提取后尽快进行后续实验。

3. 若下游实验对DNA非常敏感，建议用DNase I(RNase-free)(货号：M328)对RNA进行纯化处理。

4. 自备试剂耗材：氯仿、异丙醇(新开封或提取RNA专用)、75%乙醇(用DEPC处理过的水配制)、RNase-free Water或DEPC水、RNase-free的实验器具和耗材等。

操作步骤(实验前请先阅读注意事项)：

提示：用本制品抽提RNA时须在化学通风橱完成操作，要戴手套和护眼罩，避免接触皮肤和衣服，避免呼吸道吸入。如无特殊说明，所有的操作应该在在15~30°C的室温条件下进行操作即可。

1. 样本处理

2. 将匀浆样品剧烈震荡后在室温条件下放置5分钟以使核蛋白体完全解离。

3. 可选步骤：在4°C的条件下以12,000 rpm的离心力离心10分钟，取上清。

注：如样品中含有较多蛋白质、脂肪、多糖或肌肉、植物的块茎结节等可离心去除。离心后的沉淀中包含有细胞外膜、多糖以及高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织的样品时，上层是大量油脂应除去。取澄清的匀浆液进行下一步。

4. 每1mL提取试剂加0.2mL氯仿。盖紧管盖，剧烈震荡15秒并将其在室温下放置2~3分钟。

5. 在4°C 12,000 rpm的离心机上高速冷冻离心10-15分钟。离心后混合物分成三层：下层红色有机苯酚氯仿层，中间层，上层无色的水样层。RNA无一例外的存在于水样层当中。水样层的容量大约为所加提取试剂容量的50-60%左右。

注：下层红色有机层和中间层是蛋白和DNA，如果需要提取，请联系我们索取提取方法。

6. 将水样层转移到一干净的离心管中，加入等体积异丙醇，颠倒混匀后室温放置10分钟。

注：RNA沉淀在离心前通常不可见，离心后在管侧和管底形成胶状沉淀。

7. 在室温或者4°C 12,000 rpm离心10分钟，弃上清。

8. 加入75%乙醇洗涤沉淀。每使用1mL的提取试剂用1mL的75%乙醇对沉淀进行洗涤。

9. 在室温或者4°C用12,000 rpm离心3分钟，弃上清(注意不要丢失RNA沉淀)。

注：剩余的少量液体可短暂离心，然后用枪头吸出，注意不要吸弃沉淀。

10.  室温放置2-3分钟，晾干。加入30-100μL RNase-free Water，充分溶解RNA，得到的RNA保存在-70℃，防止降解。

注：沉淀不要过分干燥，以免难于溶解。

常见问题：

产品说明书.pdf