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产品储存:本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:
1. Wash Solution 1和 Wash Solution 2加入无水乙醇后,可以在常温保存。
2. Wash Solution 2可能加入乙醇使用几天后出现沉淀晶体,并不影响使用,直接不吸晶体,吸上清使用就可以。
3. 运输在常温下进行,不影响使用效果。
4. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH 值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍:
1. 本试剂盒在特定高盐条件下RNA(包括microRNA等小RNA) 与硅胶吸附膜高效、专一地结合,同时最大限度除去蛋白质、无机盐离子和许多有机杂质等,在低盐条件下,RNA(包括microRNA等小RNA) 被洗脱。可处理的RNA 样品量可高达100 μg。
2. 本试剂盒用于从酶反应液(如DNase 处理、体外转录、RNA加帽、蛋白酶处理、RNA标记等)中纯化回收RNA,也可用于从其它方式提取获得的RNA 的纯化。不但可以纯化大片段的mRNA等RNA,也可以纯化microRNA在内的各种小的RNA。纯化的总RNA没有蛋白的污染,所得的RNA 可用于NGS RNA文库构建、反转录荧光定量PCR、Northern blot、 Formation of ribonucleoprotein (RNP) complexes for genome editing、显微注射、RNA标记、 RNA干扰、转染等下游实验。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机。
2. 如果RNA样品很微量,可以选配艾德莱特殊超微量离心柱用来回收微量样品。
操作步骤:
提示:第一次使用前请先在Wash Solution 1和Wash Solution 2瓶中加入指定量乙醇。加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!以下所有步骤均可以在室温进行,但是应该迅速操作,减少RNA降解机会。
1. 冰上RNA样品加入RNase-free Water补足至100μL,加入200μL结合液MRC,混匀。
2. 加入375μL(1.25倍体积)无水乙醇,混匀,无需离心。
注:一般回收大于25nt的RNA,加1.25倍体积无水乙醇就可以,如果希望回收大于15nt的RNA,可以加2倍体积无水乙醇。
3. 上一步所得溶液和可能有的沉淀一起转入吸附柱RA中(吸附柱套在收集管内),13,000rpm 离心30秒,弃掉收集管中的废液,将吸附柱重新套回收集管。
4. 加700uL Wash Solution 1 (请先检查是否已加入乙醇!),13,000rpm 离心30秒,弃掉废液。
5. 加500uL Wash Solution 2 (请先检查是否已加入乙醇!),13,000rpm 离心30秒,弃掉废液。
6. 重读一遍步骤5。
7. 将吸附柱RA放回空收集管中,13,000rpm 离心2分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
8. 取出吸附柱RA,放入一个RNase-free离心管中,根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加50-80μL RNase-free Water(事先在80-90℃水浴中加热效果更好),室温放置2分钟,13,000rpm 离心1分钟。如果需要较多RNA,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,离心1分钟,或者另外再加30μL RNase-free Water,离心1分钟,合并两次洗脱液。
注:洗脱体积越大,洗脱效率越高,如果需要RNA浓度较高,可以适当减少洗脱体积,但是最小体积最好不少于30μL,体积过小降低RNA洗脱效率,减少RNA产量。
品牌: | 爱普科学 |
英文名称: | AipPure Enhanced RNA Purification Kit,With Small RNA(Centrifugal Column) |
规格: | 50T |
性状: | 液体 |
储存温度: | RT |
保质期: | 12个月 |
产品说明: | 收到产品后,请尽快按照试剂盒内各组分的储存温度保存! |
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