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储存条件:室温运输,室温避光保存,保质期12个月。
产品简介:
WB抗体剥离液又称Western Blot一抗二抗洗脱液(Stripping Buffer)、膜再生液或一抗二抗去除液,用于Western中结合了抗体的膜的重复利用。多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱,不宜重复利用膜,一般可以利用2~3次。
本产品采用酸性洗涤配方,不含有β-巯基乙醇等有机试剂,能够快速有效的去除结合在印迹膜上的抗体,随后可使用不同的抗体进行下一轮Western Blot实验,因而可利用同一张膜进行多次蛋白检测,适用于少量样品多次检测不同的蛋白质。即使样品量并不匮乏,采用这一方法多次检测同一张膜上的蛋白,也可大大节约时间,而且可以消除重新上样带来的误差。
使用说明:
1. 将曝光后的膜取出,加入适量的WB抗体剥离液(需充分覆盖膜表面),室温振摇孵育15 分钟左右(孵育时间应根据不同的目的蛋白来调整:比如内参抗体等表达量较高的蛋白,使用WB抗体剥离液时可以延长孵育时间至1小时或者在37℃孵育30分钟)。
2. 弃去WB抗体剥离液,用15mL缓冲液(PBST或TBST)洗膜3次,每次5分钟,室温振摇。
3. 为了检测酶标二抗洗脱是否完全,此时可以用显色方法来确定二抗是否洗脱掉。
4. 待检测完毕,确认膜上无残留的酶活性,再生后的膜通过加入15mL的封闭液进行封闭,室温30分钟或者2~8℃封闭过夜。
5. 重新加入待测一抗,进行下一轮的Western Blot实验。
注意事项:
1. 建议先检测表达量较低的目的蛋白,在用WB抗体剥离液处理后检测表达量高的蛋白,如内参蛋白等。
2. 使用ECL等类似的化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂,使用非化学发光试剂进行的Western检测(例如DAB,NBT/BCIP)不适用于本试剂。
3. 使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱,不宜重复利用膜,一般可以利用2~3次。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5. 本制品仅供科研使用,严禁用于临床诊断和药物等用途。
品牌: | 爱普科学 |
英文名称: | Western Blot Stripping Buffer(Acidity) |
规格: | 100mL/500mL |
性状: | 液体 |
储存温度: | RT |
保质期: | 12个月 |
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