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储存条件:室温运输和保存,保质期2年。
产品简介:10×Western转膜液,可以用于Western时湿法电转膜,使用前需配制成1×Western转膜液。本转膜液不含甲醇和SDS,无需调节pH值。
使用方法(仅供参考):
一、1×Western转膜液配制方法:量取100mL 10×Western转膜液,然后按照下表配制1×Western转膜液:
注:甲醇和SDS在转膜中有拮抗作用。甲醇使蛋白更加结合在膜上,而SDS让蛋白更加离开膜。因此对大蛋白转膜来说,多加SDS,少加甲醇;而对小蛋白转膜,多加甲醇,少加SDS。
二、转膜:
1. 膜的选择:转膜可以选择PVDF膜或NC膜。根据蛋白大小选择膜的孔径。一般说来,大于20kD蛋白选择0.45μm孔径,低于20kD选择0.22μm孔径。PVDF膜使用前需用无水甲醇润湿活化处理。
2. 三明治结构:制作三明治时,将膜置于转膜夹芯正极一侧,凝胶置于转膜夹芯负极一侧,这样凝胶上带负电荷的蛋白才能转移到膜上。蛋白转膜三明治结构为:负极(电转夹黑色面)-海绵垫-滤纸-凝胶-膜-滤纸-海绵垫-正极(电转夹白色面)。
3. 转膜条件:以下转膜条件仅供参考,请根据目的蛋白确定最佳的转膜条件。
注意事项:
1. 转膜液如果颜色变成浅棕色或黄褐色,应弃用。
2. 1×Western转膜液建议现用现配,不建议保存。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4. 本制品仅供科研使用,严禁用于临床诊断和药物等用途。
品牌: | 爱普科学 |
英文名称: | Western Transfer Buffer(10×) |
规格: | 500mL |
性状: | 液体 |
储存温度: | RT |
保质期: | 24个月 |
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