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货号及规格:
目录编号 | 包装规格 |
P306-01 | 20T |
P306-02 | 60T |
试剂盒组成和储存:
试剂盒组成 | 保存 | P306-01 | P306-02 |
染色液A(100×) | RT | 5mL | 15mL |
染色液B(100×) | RT | 5mL | 15mL |
储存条件:常温运输,室温保存,12个月内有效。
产品介绍:新型快速蛋白染色试剂是一种本公司开发的最新蛋白染色试剂,它是基于一种最新的偶离子染色技术研制而成。它的独特染色成份可以迅速的渗入蛋白凝胶,并选择性的结合蛋白条带,因此不需要脱色就可以直接观察,缩短整个蛋白染色时间至1-1.5个小时。同时由于染料和蛋白的亲和度大大提高,因此它的敏感度可以比传统考马斯亮兰染色高5-10倍。由于它的敏感度和快速的特点,该产品正逐渐的替代了传统考马斯染色的方法。
产品特点:
1. 敏感度高,比传统考马斯染色高5-10倍。
2. 速度快,整个过程大约需要1-1.5个小时。
3. 肉眼可以直接观察染色过程而且不需要脱色,灵活方便。
4. 条带更加锐利和清晰。
5. 在5-1500ng 范围内有良好的线性关系,大大优于传统染色。
操作步骤(实验前请先阅读注意事项):
0.75毫米厚4-20%的mini-PAGE胶
提示:各操作步骤都要保证足够量的液体盖过胶,并且在摇床上中速振摇进行;准确配制30%甲醇/7%醋酸溶液备用,浓度误差越小越好,最大不应该大于0.5%,否则可能影响染色效果。
1. 电泳后用清水冲洗胶30-60秒钟,然后将PAGE胶放置于一个适当大小容器中,根据胶大小倒入50ml的30%甲醇/7%醋酸溶液摇床上漂洗固定30分钟。
注意:漂洗时间取决于凝胶的大小和厚薄。大于1mm的厚胶需要漂洗60 分钟,或30 分钟洗涤后换液重复漂洗一次。大尺寸凝胶应该按比例加大漂洗液用量和漂洗至少60 分钟。充分彻底的洗涤可以防止加入染液时和SDS作用出现沉淀,并提高蛋白染色灵敏度。
2. 尽量倒干净洗液,根据胶大小倒入适量30%甲醇/7%醋酸溶液。
注意:确保胶都浸没在染色液内,25ml足够染色一块普通的8×8cm的标准迷你胶。
3. 在离心管内按等体积比例混合溶液A和溶液B(按照1:100的比例加入溶液A和溶液B,如上一步骤加入了25ml 30%甲醇/7%醋酸溶液,则溶液A和溶液B加入量各为0.25ml),混合后加入到甲醇/醋酸溶液内立刻充分混匀后置于摇床上染色。
注意:不要直接加到胶上,加到溶液内立刻摇晃混匀。
4. 一般10-15分钟便可以直接看到紫兰色的蛋白条带,在直视下根据需要随时结束染色。弃染液,用水冲洗即可终止染色(可染色过夜得到最大灵敏度)。
5. 染色后凝胶可保存于去离子水或者30%甲醇/7%醋酸溶液,或直接进行照像、扫描、干胶等后续处理。
注意事项:
1. 染料有时会在容器壁上析出形成沉淀,因此染色液每次使用前充分混匀,将壁上可能析出的沉淀重新溶解,取用后,应立即旋紧瓶盖,避免长时间暴露于空气中造成挥发、变质、pH值改变等不良影响。
2. 需要用户自备甲醇和醋酸。
3. 染色液含有甲醇,为了您的安全和健康,请穿实验服并配戴一次性手套操作,如溅入眼睛应该用大量清水清洗。
4. 本产品仅供科研用途,不用于临床诊断和药物等。
品牌: | 爱普科学 |
产品别名: | New Rapid Pprotein Staining Kit |
规格: | 20T/60T |
性状: | 液体 |
储存温度: | RT |
保质期: | 12个月 |
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