产品储存：本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。

储存事项：

1. 蛋白酶K保存在即用型甘油缓冲液中，常温运输，收到后，不超过25℃室温至少保存6个月，4℃保存12个月，－20℃            保存2年。

2. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

产品介绍：本试剂盒适用于动物组织、血浆、血清、淋巴液、培养上清、分泌物、拭子、粪便、牛奶、尿液等样品中病毒核酸的提取，可同时提取样本中的DNA和RNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，配合本公司独特的裂解液配方可以可最大限度的回收高纯度病毒核酸。提取的病毒RNA/DNA纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种下游应用实验，如反转录和RT-PCR。

注意事项：

1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机。

2. 冰箱内保存的样品，使用前将样品平衡至室温。

操作步骤(实验前请先阅读注意事项)：

提示：第一次使用前请先在漂洗液RW瓶加入指定量无水乙醇！将样品平衡至室温。

1. 无细胞体液(例如：血浆/血清/淋巴液/无细胞体液/细胞培养上清液/尿液)：

a. 200μL血清等体液(需回复到室温，不足可用0.9% NaCl或者PBS补足)转入1.5mL离心管，加入400μL裂解液VLB， 立刻涡旋振荡15秒充分混匀。

b. 室温(15-25℃)放置10分钟。

c. 加入450μL无水乙醇，立刻涡旋振荡15秒充分混匀。

注：如果周围环境高30℃，乙醇需要再在冰上预冷后再加入。

d. 立刻接操作步骤的步骤5。

2. 粪便样品：

a. 取0.5-1mL粪便样本悬浮于5mL生理盐水中，彻底涡旋振荡混匀后，4,000xg (6,000rpm)离心20 min后取上清200μL转入1.5mL离心管，加入400μL裂解液VLB，立刻涡旋振荡15秒充分混匀。

b. 室温(15-25℃)放置10分钟。

c. 加入450μL无水乙醇，立刻涡旋振荡15秒充分混匀。

d. 立刻接操作步骤的步骤5。

3. 鼻拭子/咽拭子：

a. 取样后与生理盐水或病毒运输液彻底颠倒或涡旋振荡混匀后取200μL转入1.5mL离心管，加入400μL裂解液VLB，立刻涡旋振荡15秒充分混匀。

b. 室温(15-25℃)放置10分钟。

c. 加入450μL无水乙醇，立刻涡旋振荡15秒充分混匀。

d. 立刻接操作步骤的步骤5。

4. 组织样本(气管、肺、喉头、脾脏、扁桃体、法氏囊、肾脏和淋巴结等)：

a. 选取病变明显的组织块剪取样品约20mg(备注：A.可选择多部位剪碎混匀后再取。B.一粒大米重约20mg。C.请勿使用过量组织，影响提取效果)，依次加入150μL裂解液VLB、450μL实验室纯水或者去离子水(不用灭菌)和20μL蛋白酶K，用眼科剪反复多次剪碎混匀或用电动匀浆器匀浆，置56℃水浴中消化15-30分钟(视消化情况)后瞬时离心取上清。

b. 将上述处理后样本离心取上清100μL转入1.5mL离心管，加入300μL裂解液VLB，立刻涡旋振荡充分混匀。

c. 加入250μL无水乙醇，立刻涡旋振荡15秒充分混匀。

d. 立刻接操作步骤的步骤5。

5. 将混合物(每次小于720μL，多可以分两次加入)加入一个吸附柱RA中，(吸附柱放入收集管中)12,000rpm离心1分钟，弃掉废液。

注：确保离心后液体全部滤过去，膜上没有残留，如有必要，可以加大离心力和离心时间。

6. 加500μL去蛋白液RE，12,000rpm离心30秒，弃废液。

7. 加入500μL漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!)，12,000rpm 离心30秒，弃废液，加入500μL漂洗液RW，重复一遍。

8. 将吸附柱RA放回空收集管中，12,000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

9. 取出吸附柱RA，放入一个RNase-free的离心管中，在吸附膜的中间部位加30-50μL RNase-free Water，室温放置1分钟，12,000rpm 离心1分钟。如果想得到较多量的DNA/RNA，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，12,000rpm离心1分钟。

注：洗脱体积越大，洗脱效率越高。如果需要DNA/RNA浓度较高，可以适当减少洗脱体积，但是最小体积不应少于20μL，体积过小降低洗脱效率，减少DNA/RNA产量。

10. 病毒离心管中所得液体即为检测所需的样本DNA或RNA。核酸提取完后请立即实验。如需短期保存，DNA病毒核酸可以存放可以放置在-20℃冰箱；RNA病毒核酸立刻短期放置在-70℃超低温冰箱。

产品说明书.pdf