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产品储存:4℃运输;-20℃保存,12个月有效期。
产品简介:Exonuclease III(E.coli)是来源于大肠杆菌的外切核酸酶Ⅲ,由大肠杆菌重组表达,表现出4种催化活性。3'-5'脱氧核糖核酸外切酶活性对双链DNA具有特异性,从3'OH末端方向逐步切去5'-单核苷酸,其最佳底物为平末端、5'突出端或缺口双链DNA。其在DNA 3'-突出端(至少4个碱基长,且不带有3'-末端C-残基)、单链DNA或硫代磷酸酯连接的核苷酸上不具有活性。Exonuclease III(E.coli)具有3'磷酸酶活性可以去除3'-末端磷酸基团,生成一个3'-OH基团。其RNase H活性可以以核酸外切酶方式降解RNA-DNA杂交体中的RNA链。无嘌呤/无嘧啶-核酸内切酶活性在无嘌呤或无嘧啶位点切割磷酸二酯键,产生5'-末端(无碱基脱氧核糖5'-磷酸残基)。主要用于DNA双脱氧测序的单链模板制备、定点突变、链特异性探针制备等。
产品来源:来源于大肠杆菌,由大肠杆菌重组表达。
酶活定义:在37℃、pH 8.0条件下,30min内产生1nmol的酸可溶性物质所需的酶量定义为一个酶活单位。
产品浓度:100U/μL。
产品纯度:SDS-PAGE检测纯度≥95%。
失活或抑制:70℃孵育20min可失活。
酶存储Buffer:25mM Tris-HCl,50mM KCl,0.5mM DTT,50%Glycerol,pH 8.0。
10x Reaction Buffer:500mM Tri-HCl,100mM MgCl2,10mM DTT,pH 8.0。
操作步骤:
1. 参考下表配置反应体系:
Component | Volume |
Exonuclease III(E.coli) | 0.5μL |
10х Reaction Buffer | 5μL |
DNA样品 | ≤5μg |
Nuclease-Free water | To 50μL |
2. 将反应体系充分混匀,于37℃孵育30min。
3. 反应完成后,70℃孵育20min终止反应。即可进行后续实验操作。
注意事项:
1. 酶的取用都应放在低温冰盒内操作,使用完毕后立即存储于-20℃保存。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 本产品仅供科研使用,严禁用于临床诊断和药物等用途。
品牌: | 爱普科学 |
英文名称: | Exonuclease III(E.coli) |
规格: | 5KU |
性状: | 液体 |
储存温度: | -20℃ |
保质期: | 12个月 |
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