产品储存：-20℃运输和保存，保质期12个月。

产品纯度：SDS-PAGE检测纯度≥95%，无蛋白酶，≥250U/μL。

产品简介：本公司生产的全能核酸酶(Benzonase Nuclease)，又称广谱核酸酶，是一种来源于粘质沙雷氏菌(Serratia Marcescen)的非特异性核酸内切酶。该内切酶可以在非常宽泛的条件下攻击并降解所有形式的DNA和RNA(单链、双链、线性、环化)，在核酸链内任意位置进行切割，将核酸完全降解为3-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸。pH工作范围为6-10，最适pH为8.0，工作温度范围为0-42℃，最适温度为37℃。全能核酸酶用途广泛，常用于重组蛋白、病毒疫苗等生物制品中去除核酸，可以有效降低细胞、组织、微生物等蛋白裂解液的粘度等。本产品没有His-tag。

酶活性定义：pH 8.0(37℃)反应条件下，2.625mL反应体系中，在30min内使△A260吸收值变化1.0(相当于完全消化37μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸)所需酶量定义为一个酶活单位。

酶储存缓冲液：20 mM Tris-HCl，2 mM MgCl2，2 mM NaCl，50% Glycerol，pH 8.0。

稀释缓冲液：20 mM Tris-HCl，2 mM MgCl2，2 mM NaCl，pH 8.0。

操作步骤：

1. 用于降低细胞、组织或细菌裂解液的粘度：

细胞样本：

a. 贴壁细胞样品去除培养基后，再次用PBS清洗。每1mL RIPA裂解液(推荐P318)中加入1-2μL全能核酸酶，然后按照裂解液的使用说明用于贴壁细胞的裂解。室温或冰上孵育5-30min，收集裂解液，离心后取上清即可进行后续实验。

b. 悬浮细胞样品离心收集后，去上清。每1mL RIPA裂解液(推荐P318)中加入1-2μL全能核酸酶，然后按照裂解液的使用说明用于悬浮细胞的裂解。室温或冰上孵育5-30min，收集裂解液，离心后取上清即可进行后续实验。

组织样本：组织块用预冷PBS清洗去除血污，剪成细小的碎块。按照每50mg组织加入1mL裂解液(推荐P318)的比例添加，同时加入1-2μL全能核酸酶。将组织进行研磨，直至充分裂解。组织充分裂解后，室温或冰上孵育5-30min，收集裂解液，离心后取上清即可进行后续实验。

细菌、真菌样本：细菌或真菌离心收集后，每1mL裂解液(推荐P318)中加入1-2μL全能核酸酶，然后按照裂解液的使用说明用于细菌或真菌的裂解。室温或冰上孵育5-30min，收集裂解液，离心后取上清即可进行后续实验。

注：常用的裂解液中含有不同浓度的Triton X-100或NP-40、SDS及脱氧胆酸钠等，这些试剂对全能核酸酶有一定的影响，所以对于不同实验需要适当增加酶量或延长孵育时间。

2. 用于去除重组蛋白中的核酸：推荐反应体系中全能核酸酶的终浓度为90U/mL，可以降解体系中所有核酸。

3. 用于提高包涵体蛋白复性率：推荐细胞裂解液中全能核酸酶的酶浓度为1U/mL，可以有效降低由于基因组DNA而粘附的蛋白酶，提高包涵体纯度，最终提高包涵体蛋白的复性率。

全能核酸酶使用效果图：

A：293细胞经RIPA裂解液裂解后，未加入全能核酸酶的样品基因组DNA大量释放呈粘稠状，而加入了全能核酸酶的样品由于释放的基因组DNA被降解不粘稠。

B：在1g大肠杆菌湿菌中加入5mL RIPA裂解液混匀后，分别加入相应量的全能核酸酶(0、80、300U/mL)，室温处理30min后拍照观察。

C：分别取40μg鲑鱼精DNA，加入相应量的全能核酸酶，于37℃孵育30min后琼脂糖凝胶检测。

全能核酸酶推荐使用条件见下表：

注意事项：

1. Mg²⁺是全能核酸酶的关键催化辅因子，反应缓冲液含有1-2 mM Mg²⁺对全能核酸酶的活性是必须的。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3.本产品仅供科研使用，严禁用于临床诊断和药物等用途。

产品说明书.pdf