B1031  DAPI试剂

产品别名：4',6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐

英文名称：4',6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochloride

CAS： 28718-90-3

分子式：C16H15N5-2HCl

分子量：350.25

储存条件：2-8°C避光储存

外观(性状)：黄色粉末

单位：支

纯度：≥95%

有效期：两年

产品简介：DAPI 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。和双链DNA结合后可以产生比DAPI 自身强20多倍的荧光。和EB (Ethidium Bromide)相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。

产品应用：DAPI 染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染 色以及某些特定情况下的双链DNA染色。DAPI 的最大激发波长为340nm，最大发射波长为488nm； DAPI 和双链 DNA结合后，最大激发波长为364nm，最大发射波长为454nm。

使用方法：可溶解于水、DMSO和DMF。用于细胞核染色时，推荐的DAPI 工作浓度为0.5-10ug/mL。建议分装保存，避免反复冻融。

1. 配制工作液：用双蒸水或PBS稀释母液，配制成所需要的工作浓度(0.5-10ug/mL)。

2. 固定的细胞或组织染色：对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。DAPI 染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI 染色。

a. 对于贴壁细胞或组织切片：加入适量DAPI 染色液，覆盖住样品即可；对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。

b. 吸除DAPI 染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。

c. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm，发射波长460nm。

3. 活细胞或组织染色：

a. 细胞培养物中加入适量DAPI 染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1 mL 染色液，对于96孔板一个孔需加入100uL 染色液。

b. 在37°C培养细胞10~20分钟。

c. 用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm，发射波长460nm。

注意事项：

1. DAPI 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

2. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

3. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5. 本产品仅供科研使用，请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等。