产品保存：室温保存，保质期一年。

产品说明：

*HR10/10 层析柱，5 cm 柱床高度

使用方法(仅供参考)：

将干粉浸泡于纯水或缓冲液中，室温下完全溶胀需 1-2 天，100 度热水大概需要半个小时。完全溶胀后除去上清液，用缓冲液彻底清洗填料。

1. 装柱

⑴ 将所有实验材料均需平衡至进行色谱层析操作的温度。

⑵ 缓冲液脱气处理。

⑶ 在柱子下端加入纯水装柱子，以排除气泡，将填料连续倒入柱子时，要用玻璃棒紧靠柱子内壁引流，以减少气泡的产生，让填料先自然沉降到填料体积不再变化，用上样的平衡液平衡柱后即可上样。

2. 上样

⑴ 最常见的程序是让目标分子结合到离子交换柱上，其他杂质流出。然而，在一些情况下，结合杂质而使目标分子不结合而穿透柱子，也是可以的。

⑵ 对于目标分子的吸附，选择具有适当 pH 的缓冲液是至关重要的，请参考下表；

Handbook of chemistry and physics, 83rd edition, CRC, 2002-2003.

⑶ 缓冲液的离子强度应保持较低，以免干扰样品结合，推荐的操作 pH 在缓冲液的 pKa 的 0.5pH单位内，并且高于目标分子的等电点（pI）至少一个 pH 单位。

3.洗脱

对于 CM 葡聚糖凝胶和 SP 葡聚糖凝胶填料，使用递增的盐梯度(线性或者阶梯洗脱)或递增的 pH 梯度(线性或者阶梯洗脱)实现洗脱。

4.再生

根据样品的性质，通常通过用高离子强度缓冲液（例如 1-2M NaCl）洗涤，或降低缓冲液 pH，然后在平衡缓冲液中重新平衡来进行再生。 在一些应用中，诸如变性蛋白质或脂质的物质在再生过程中洗脱不下来，则需要通过在位清洗程序 CIP 来清除。

5.在位清洗(CIP)

⑴ 通过用 5 倍柱床体积的 2M NaCl 溶液来除去结合的蛋白质。

⑵ 通过用 2 倍柱床体积的 0.1M NaOH 溶液清洗填料，随后用大量纯水或者缓冲液彻底清洗直至不含碱，从而除去沉淀的蛋白质，疏水结合的蛋白质和脂蛋白。

⑶ 用高达 70％的乙醇或 30％异丙醇溶液清洗填料，可以除去强疏水结合的蛋白质，脂蛋白和脂质。

⑷ 请避免使用磷酸，醋酸缓冲液，可以采用 Tris-HCl 作为使用 Buffer。

6.保存

使用完的填料，用纯水彻底冲洗，最后保存在 4℃（保存溶液为 20%乙醇），不能冷冻。未用过的产品室温密闭保存。

注意事项：

1. 上样之前，样品必须经过膜过滤及去除色素，否则杂质及色素会被吸附到填料上，影响填料的正常使用。

2. 在使用过程中，避免使用高浓度的强酸强碱，酸和碱的浓度应低于 0.15 摩尔。碱会使流速变慢。

3. 离子交换介质在选择层析柱时，避免使用细长柱，会增加实验操作压力。

4. 不同的样品，吸附和洗脱方法不相同，可以根据相关的文献进行。

5. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

6. 本产品仅供科研使用，严禁用于临床诊断和药物等用途。