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储运温度:-20℃保存和运输,保质期至少6个月。
制品浓度:5U/μL。
制品说明:T4 DNA Ligase 是从表达T4 DNA Ligase 基因的大肠杆菌经诱导表后分离纯化而来的。它催化相邻DNA链的的5’-磷酸末端和3’羟基末端以磷酸二酯键结合反应。该酶催化平滑末端或粘性末端DNA的连接,修复双链DNA、RNA、DNA/RNA杂交中的单链中的单链切口。
适用范围:
1. DNA片段和载体DNA快速连接。
2. 限制酶切片段的克隆。
3. 将DNA片段与Linker或Adaptor连接。
酶贮存缓冲液:20mM Tris-HCl (pH7.5)、0.1mM EDTA、1mM DTT、50mM KCl、50% glycerol。
10× Ligation Buffer:400mM Tris-HCl、100mM MgCl2、100mM DTT、5mM ATP(PH7.8)、其他成分。
建议连接反应体系:(以10μl反应体系为例)
标准反应管 | 阳性对照管 | |
Vector | μL | μL |
PCR产物 | n μL ** | / |
对照插入DNA片段 | / | 1μL |
T4 DNA连接酶(5U/μL) | 2~5U | 2~5U |
10× Ligation Buffer | 1μL | 1μL |
加去离子水至终体积 | 10μL | 10μL |
反应循环的设置:
粘端连接:22oC反应10分钟(可根据需要延长到1小时);也可以16oC反应1-5小时。
平端连接:22oC反应2小时或16 oC过夜。
注意事项:
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 本制品仅供科研使用,严禁用于临床和诊断等用途。
品牌: | 爱普科学 |
产品别名: | T4 DNA Ligase |
规格: | 100U/300U |
性状: | 液体 |
储存温度: | -20℃ |
保质期: | 12个月 |
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