- 产品介绍
- 商品属性
- 资料下载
- 产品问答
产品储存:-20℃运输和保存,保质期2年。
产品介绍:本产品是一系列经过基因工程重组的快速限制性内切酶,适用于质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。所有快速内切酶在通用的FastCut Buffer中都具有优良的活性,能够在5-15分钟内完成酶切。FastCut Color Buffer包括红色和黄色示踪染料,可将产物直接用于凝胶电泳。Color Buffer的红色染料与2500bp双链DNA 片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近;黄色染料与10bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。
酶切位点:

产品特点:
1. 通用缓冲液。
2. 快速内切酶,可在5-15 min内完成反应。
3. 3 h温育未表现星号活性。
失活条件:80℃温育20分钟。
质量控制:

使用方法(仅供参考):
1. DNA快速酶切流程
1) 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系:

注:本体系适用于经过纯化的PCR产物酶切。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度,10× FastCut Buffer加入量可适当减少至2μL。但由于DNA聚合酶同时具有外切酶活性,会影响酶切产物,因此如下一步需进行克隆等操作,建议酶切前对PCR产物进行纯化。
2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴。
3) 37℃温育15 min(质粒),或15-30 min(PCR产物),或30-60 min(基因DNA)。
4) 80℃温育20 min即可使酶失活,停止反应(可选)。
5) 如果使用10× FastCut Color Buffer进行酶切反应,得到的产物可以直接进行上样电泳。
2. 双酶切或多酶切
1) 每种快速内切酶的用量为1μL,并根据需要适当扩大反应体系。
2) 所有快速内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。
3) 如果所用的几种快速内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,在其最适反应温度下进行酶切反应。
3. 适用于质粒的扩大反应体系

注:如果总反应体系大于20μL,应适当增加温育时间,尽量使用水浴、金属浴或沙浴。
不同DNA中的酶切位点数量:

在不同品牌反应缓冲液中的兼容性:

在不同品牌反应缓冲液中的兼容性:

注意事项:
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 本制品仅供科研使用,严禁用于临床诊断和药物等用途。
| 品牌: | 爱普科学 |
| 英文名称: | FastCut AscI Restriction Endonucleases |
| 规格: | 200T |
| 性状: | 液体 |
| 储存温度: | -20℃ |
| 保质期: | 2年 |
| 产品特点: | TAKARA同款! |

