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FastCut HpaII 快速限制性内切酶

货号:CE550-01

品牌:爱普科学

货期:2-3天

价格:240

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产品储存:-20℃运输和保存,保质期2年。

产品介绍:本产品是一系列经过基因工程重组的快速限制性内切酶,适用于质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。所有快速内切酶在通用的FastCut Buffer中都具有优良的活性,能够在5-15分钟内完成酶切。FastCut Color Buffer包括红色和黄色示踪染料,可将产物直接用于凝胶电泳。Color Buffer的红色染料与2500bp双链DNA 片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近;黄色染料与10bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。

酶切位点:

FastCut AscI 快速限制性内切酶(图1)

产品特点:

1. 通用缓冲液。

2. 快速内切酶,可在5-15 min内完成反应。

3. 3 h温育未表现星号活性。

失活条件:80℃温育20分钟。

质量控制:

FastCut AscI 快速限制性内切酶(图2)

使用方法(仅供参考)

1. DNA快速酶切流程

1) 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系:

FastCut AscI 快速限制性内切酶(图3)

注:本体系适用于经过纯化的PCR产物酶切。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度,10× FastCut Buffer加入量可适当减少至2μL。但由于DNA聚合酶同时具有外切酶活性,会影响酶切产物,因此如下一步需进行克隆等操作,建议酶切前对PCR产物进行纯化。

2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴。

3) 37℃温育15 min(质粒),或15-30 min(PCR产物),或30-60 min(基因DNA)。

4) 80℃温育20 min即可使酶失活,停止反应(可选)。

5) 如果使用10× FastCut Color Buffer进行酶切反应,得到的产物可以直接进行上样电泳。

2. 双酶切或多酶切

1) 每种快速内切酶的用量为1μL,并根据需要适当扩大反应体系。

2) 所有快速内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。

3) 如果所用的几种快速内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,在其最适反应温度下进行酶切反应。

3. 适用于质粒的扩大反应体系

FastCut AscI 快速限制性内切酶(图4)

注:如果总反应体系大于20μL,应适当增加温育时间,尽量使用水浴、金属浴或沙浴。

不同DNA中的酶切位点数量:

FastCut AscI 快速限制性内切酶(图5)

在不同品牌反应缓冲液中的兼容性:

FastCut AscI 快速限制性内切酶(图6)

在不同品牌反应缓冲液中的兼容性:

FastCut AscI 快速限制性内切酶(图7)

注意事项:

1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本制品仅供科研使用,严禁用于临床诊断和药物等用途。

品牌: 爱普科学
英文名称: FastCut AscI Restriction Endonucleases
规格: 200T
性状: 液体
储存温度: -20℃
保质期: 2年
产品特点: TAKARA同款!
地址:北京市昌平区北清路1号珠江摩尔国际大厦5号楼2单元305
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