产品储存：4℃运输；-20℃保存，12个月有效期。

产品简介：Poly(A) Polymerase，也称Poly(A)加尾酶，来源于大肠杆菌，以不依赖于模板的方式催化由ATP转化成的AMP添加到单链RNA的3’末端，以形成Poly(A)尾。Poly(A) Polymerase的加尾效率很高，可以在RNA的3'末端加入20~200个A碱基。主要用途：RNA末端标记、mRNA体外合成等。

产品来源：来源于大肠杆菌由大肠杆菌重组表达。

酶活定义：在37℃、pH 8.0条件下，10分钟内使1nmol AMP掺入RNA末端所需的酶量定义为1个酶活单位。

产品浓度：5U/μL。

产品纯度：SDS-PAGE检测纯度＞95%；内源性核酸残留量＜1 pg/μL(qPCR检测)。

失活或抑制：EDTA至浓度为10nM或65℃加热20min失活。

酶存储Buffer：20mM Tris-HCl，300mM NaCl，1mM DTT，1mM EDTA，0.1% Triton X-100，50%Glycerol，pH 7.5。

10x PAP Reaction Buffer：500mM Tris-HCl，2.5mM NaCl，100mM MgCl₂，pH 8.0。

操作步骤：

1. 参考下表配置反应体系：

2. 将反应体系于37℃孵育30min。加入EDTA至终浓度10mM或65℃加热20min以终止反应。

注：用于加尾反应的RNA应该进行适当纯化。

注意事项：

1. 涉及RNA操作，需要严格按照RNA操作的规范进行，避免RNase污染，相关试剂和耗材需要经过DEPC处理以去除RNase或者确保是RNase-free的条件。

2. 该酶也可以使用M-MuLV逆转录酶反应缓冲液进行反应，反应需要有Mg2+等二价阳离子才能发挥活性。

3. RNA加的A尾长度受酶量、ATP浓度和反应时间等因素影响，不同的实验需要加A的量会有所不同，可通过减少反应时间来调整加A的长度，该酶在37℃反应30min时可加约30个A碱基，1 h可加约100个A碱基。

4.     为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5.     本产品仅供科研使用，严禁用于临床诊断和药物等用途。

产品说明书.pdf