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RNA的体外合成转录试剂盒,T7启动子,mMESSAGE mMACHINE T7 Transcription Kit

货号:AM1344

品牌:Invitrogen

货期:2-3周

价格:5642

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mMESSAGE mMACHINE® 试剂盒设计用于体外合成大量的加帽 RNA。加帽 RNA 能模拟体内发现的大多数真核 mRNA,因为其在 5' 末端有一个 7-甲基鸟苷帽结构。mMESSAGE mMACHINE® 试剂盒反应包括超高得率转录反应中的帽类似物 [m7G(5')ppp(5')G]。帽类似物仅作为转录本的第一个或 5' 末端 G 掺入,因为其结构使得无法在 RNA 分子中的其他位置将其掺入。

mMESSAGE mMACHINE® 试剂盒如何工作
mMESSAGE mMACHINE® 试剂盒有简化的反应形式,其中所有 4 个核糖核苷酸和帽类似物混合于单一溶液中。该溶液的帽类似物:GTP 比值为 4:1,这是尽可能提高 RNA 得率和加帽转录本比例的理想选择。mMESSAGE mMACHINE® 试剂盒是对加帽 RNA 进行卵母细胞显微注射、体外翻译、转染和其他应用的常规合成的理想选择。在存在高核苷酸浓度的情况下,通过优化 RNA 合成的反应条件来实现高得率。此外,合成的 RNA 不会被任何可能含有 RNase 抑制剂(酶混合物的组分)的污染性核糖核酸酶降解。

使用 mMESSAGE mMACHINE® 试剂盒
在 2 小时孵育期间的 20 µL 反应中,mMESSAGE mMACHINE® 高得率加帽 RNA 转录将产生大量的加帽 RNA。该方法获得的得率为使用常规体外转录反应的 10–50 倍。帽类似物与 GTP 的比值已经过优化,能够在得率 (15–35 µg) 和加帽转录本的比例 (80%) 之间实现良好折衷。mMESSAGE mMACHINE® 试剂盒还包含一个 LiCl 沉淀溶液,该溶液可有效分离来自加帽 RNA 的蛋白和未掺入的核苷酸(包括自由帽类似物),提高翻译效率。mMESSAGE mMACHINE® 试剂盒仅针对与试剂盒中包含的聚合酶配合使用进行了优化。使用不同的聚合酶可能会导致得率低。mMESSAGE mMACHINE® 试剂盒包含 25 次转录反应所需的所有缓冲液和试剂。使用试剂盒提供的对照模板(非洲蟾蜍延伸因子 1α,pTRI Xef),每次 mMESSAGE mMACHINE® 反应将使用 T3 或 T7 RNA 聚合酶产生约 20–30 µg 的 RNA,或使用 SP6 RNA 聚合酶产生约 15–25 µg RNA。


规格

适用于(应用)
体外转录
产品类型
转录试剂盒
数量
25 次反应
原始材料
PCR 产物线性化 DNA
产品规格
试剂盒
产量
20-30 µg
促进剂
T7
运输条件
干冰
产品线
Ambion™、mMESSAGE mMACHINE™
最终产品类型
体外转录 RNA、加帽 RNA

内容与储存

T7 酶混合物、10X 反应缓冲液 2XNTP⁄CAP 溶液、GTP 溶液、pTRI-Xef、TURBO DNase、醋酸铵终止液、氯化锂沉淀溶液和凝胶上样缓冲液 II 均储存在 –20°C 下。可在任何温度下储存无核酸酶水。

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

品牌: Invitrogen
储存温度: -20℃
保质期: 12个月
暂无信息
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