AipMix 2× HiFi FastShort PCR MasterMix(+Dye)
货号:GP122-01
品牌:爱普科学
货期:现货
价格:¥158
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产品储存:冰块运输,-20℃保存,保质期2年,室温存放一周,无明显活性改变。
产品介绍:
本制品包含HiFi FastShort DNA Polymerase、dNTPs和优化的反应缓冲液,浓度为2×。使用时只需加入模板、引物,并补足水至Mix终浓度为1×即可。HiFi FastShort DNA Polymerase来自于基因工程改造的pfu,大大提高了扩增速度、保真性和产量。HiFi FastShort PCR MasterMix是非长片段超保真快速扩增的首选产品。
本制品含红色示踪染料,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳;也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。PCR产物为平末端,不需要加A头,可直接用爱普科学:Zero Background pTOPO-Blunt Cloning Kit/零背景pTOPO-Blunt平末端克隆试剂盒(货号:CV216)和Zero Background pTOPO-Blunt Simple Cloning Kit/零背景pTOPO-Blunt Simple平末端克隆试剂盒(不含多克隆酶切位点MCS)(货号:CV217)克隆。
染料说明:本制品含甲酚红,颜色可能在橘黄色和紫红色之间变化。颜色改变不影响产品质量和使用效果。
产品特点:
1. 快速的扩增效率:延伸速度可以达到2-4kb/min,是pfu的4-8倍。
2. 卓越的扩增产量:一般PCR产物量能比传统pfu的产量高出50%-100%。
3. 优异的保真性能:保真度是Taq的50多倍以上。一般随机挑一个菌进行测序便是正确无突变菌落。
4. 强大的扩增能力:扩增长度指标和pfu一致,可以完全替代pfu进行快速高保真扩增,但不建议用于pfu无法扩增的长片段。以复杂基因组DNA为模板适合扩增不超过3kb左右的产物,以简单基因组、质粒和噬菌体DNA为模板适合扩增不超过6kb左右的产物。
质量验证:爱普科学生产的每一批AipMix 2× HiFi FastShort PCR MasterMix在出货前,都必须通过下面的2种大小片段的扩增检测,如下图。
Figure.1. Amplification of DNA fragment from 50 ng genomic DNA in 50μLreaction mixture. Lane M: 1kb ladder; Lane 1-2: Poly(A) Polymerase from E. coli gDNA, 1.4Kb, extension 20 sec/kb; Lane3-4: Hα1AT from Human gDNA, 2.6kb, extension 30 sec/kb.
建议PCR体系设置:
PCR扩增参考模板使用量(50μL反应体系):质粒(0.1-10ng);细菌基因组(10-100ng);人类基因组(50-150ng);cDNA(1-5μLfrom RT reaction)。
建议PCR循环条件:
注意事项:
1. AipMix 2× HiFi FastShort PCR MasterMix扩增速度快,质粒和简单基因组等简单模板可以采用20秒/kb;复杂模板如人类基因组可以采用30-45秒/kb。
2. 实验过程中对于GC含量很高的模板,预变性和变性温度可以提高到98℃;HiFi FastShort PCR MasterMix耐热性强,98℃对本制剂的活性无改变。
3. 如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时,可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%-8%,按照1%梯度增加摸索最佳浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1.0-1.7 M。并采用降落PCR(Touchdown PCR)。
品牌: | 爱普科学 |
产品别名: | AipMix 2× HiFi FastShort PCR预混合试剂(含染料) |
规格: | 1mL/5*1mL/25*1mL |
性状: | 液体 |
储存温度: | -20℃ |
保质期: | 24个月 |
产品说明: | 短片段高保真扩增首选!快速扩增6kb以内长片段! |
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