产品储存：4℃运输，-20℃保存，有效期24个月。

产品浓度：5U/µL

制品说明：SuperPfu DNA Polymerase是从克隆有Pyrococcus furiosis DNA Polymerase基因的大肠杆菌中分离纯化的，经过基因工程改造后大大提高了活性、稳定性、延伸速度等指标。SuperPfu DNA Polymerase具有5′-3′DNA聚合酶活性和3′-5′外切酶活性，能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。SuperPfu酶是目前已发现的所有耐高温DNA Polymerase中出错率极低的。非常适合用于高保真PCR扩增。其PCR产物为平端，可直接用平端载体克隆。

活性单位：1单位(U)SuperPfu DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板引物，将10 nmoL脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

质量控制：SDS-PAGE检测纯度大于99%，经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。

酶贮存缓冲液：

1. 50mM Tris-HCl(pH 8.2)，0.1mM EDTA，1mM DTT，Stabilizers，50% Glycerol。

2. 10× SuperPfu Buffer(含Mg²⁺)：200mM Tris-HCl(pH8.8)，100mM KCl，100mM(NH4)₂SO₄，20mM MgSO₄，其他成分。

适用范围：用于DNA的高保真扩增，如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析(SNP)和平末端补平等。

建议的PCR条件：(以50μL反应体系为例)

参考模板用量：(50μL反应体系)

质粒：0.1-10ng；细菌基因组：10-100ng；人类基因组：50-150ng；cDNA：1-5μL from RT reaction。

注：以质粒为模板扩增，一般1kb/min就足够了。

注意事项：

1. SuperPfu酶具有3′-5′的外切酶活性，所以SuperPfu酶扩增时延伸速度比Taq酶低，应根据扩增产物的长度设置相应的延伸时间，建议SuperPfu酶的延伸速度为每分钟1kb如扩增片段小于4kb；延伸速度为每分钟0.5kb如扩增片段大于4kb。同时SuperPfu酶的3′-5′的外切酶活性可能降解引物，所以应先加dNTP后，再加SuperPfu酶到反应体系中，并立即进行PCR反应。

2. 用SuperPfu酶扩增时，引物的纯度要求较高，引物长度大于18个碱基，Tm在55－80℃之间，引物浓度在0.1-0.5μM之间，比Taq酶略高。

3. SuperPfu酶的热稳定性比Taq酶好，对于GC含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃，对SuperPfu酶的活性无影响。

4. 高保真SuperPfu对于dNTP纯度要求很高，因此建议用本酶配套的超纯dNTP Mix。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

6. 本制品仅供科研使用，严禁用于临床诊断和药物等用途。

产品说明书.pdf