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AipScript H Minus M-MuLV Reverse Transcriptase

货号：NS001-01

品牌：爱普科学

货期：现货

价格：￥380

规格：

10000U 5*10000U

数量：

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产品储存：4℃运输，-20℃保存，有效期12个月。

产品浓度：200 units/μL

制品说明：

本制品使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶AipScript Hˉ RTase。野生型的M-MuLV 包含的RNase H活性能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA，因此在cDNA第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。

本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。

适用范围：第一链cDNA合成。可用于低拷贝基因的检测。

制品特点：合成cDNA片段长度最高可达12kb。

第一链cDNA合成：(以20μL反应体系为例)

1. 加入：

Components	Volume(20μL)
Total RNA/mRNA	50ng-5μg/5-500ng
Oligo(dT)₁₈(0.5μg/μL) or Random Primer(0.1μg/μL) or GSP(Gene Specific Primer)	1μL
	1μL
	2 pmol
dNTP Mixture(10mM each)	1μL
5× RT Buffer	4μL
RNase Inhibitor(40 units/μL)	0.5μL
AipScript Hˉ RTase	0.8-1μL(见注意事项3)
RNase-free Water to final volume	20μL

2. 轻轻混匀：

如用Oligo(dT)18或基因特异引物(GSP)，42℃孵育30-50min。

如用Random Primer，25℃孵育10 min，42℃孵育30-50 min。

3. 65℃加热15 min(或者85℃加热5 min)失活AipScript Hˉ RTase。

RT-PCR：建议取1/10-1/5体积（2-4μL）的反转录产物作为PCR模板。

建议PCR条件：(以20μL或50μL反应体系为例)

AipScript H Minus M-MuLV Reverse Transcriptase(图1)

注意事项：

1. 避免RNase污染，为保证反转录成功，建议使用高质量的RNA样品。

2. 如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构，可以先只加RNA模板、引物和和RNase-free Water混匀，65℃变性5分钟，冰上冷却，短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。

3. AipScript Hˉ RTase非常粘稠，溶液容易吸附在管壁和吸头外导致损失，用前请点甩离心后使用，并且避免吸头外壁沾附损失。可以每次按照0.8μL使用，也不影响使用效果。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5. 本制品仅供科研使用，严禁用于临床诊断和药物等用途。

品牌：	爱普科学
产品别名：	AipScript RNase H活性缺失M-MuLV逆转录酶/反转录酶
规格：	10KU/5*10KU
性状：	液体
储存温度：	-20℃
保质期：	24个月
产品说明：	热销爆款！

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