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产品储存:DNase Buffer和RNase-free DNase I 需置于-20℃保存,去蛋白液RW1常温或者4℃保存,避免反复冻融。注意:DNase Buffer含Mn2+,可能有轻度发黄发黑,甚至黑色沉淀为正常现象,颠倒混匀后正常使用即可。
产品介绍:任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留,本公司的AipEasy系列RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和特殊硅胶吸附膜,可以去除绝大多数的DNA污染,所以一般不用进行DNase I 消化。但是对于一些敏感的下游实验,需要去除微量的DNA残留,可以购买本公司DNase I柱上消化试剂盒(RNase-free),直接在离心吸附柱上面消化残留的DNA,然后纯净RNA可以洗脱下来直接使用。本产品兼容所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒。
产品特点:
1. 简单快速,条件经过优化,一般15分钟可以消化清除硅胶膜上残留的DNA。
2. 品质保障,所有组分确保RNase-free,可以高效保证RNA分子的完整性。
3. 兼容性广,可整合进所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒柱上消化,不需要提取到总RNA后再单独去除里面的残留DNA。
注意事项:DNase是非常敏感,易物理损坏变性丧失活性,所以不要漩涡混匀DNase I和工作液,轻轻吹打或者上下颠倒混匀混合液即可。每次在RNA抽提操作前配制新鲜的DNase I工作液。DNase Buffer和RNase-free DNase I是专门配套试剂用于柱上消化使用(注:一般的10X DNase Buffer并不能用于膜上的DNase消化,不能替代)。
操作步骤:
1. 按照正常RNA提取步骤操作,裂解混合物过柱离心完全后(RNA包括残留DNA吸附到离心柱硅胶膜上),加入去蛋白液RW1步骤前按照以下步骤操作。
2. 取一个新的1.5mL离心管,加入45μL DNase Buffer和5μL RNase-free DNase I,轻轻吹打混匀成DNase I工作液(处理多个离心柱要按照比例放大制备DNase I工作液)。置冰上备用。
注:如果残留DNA过多导致消化不完全,可按比例加大使用酶量来提高消化效果(如90μL DNase Buffer和10μL RNase-free DNase I)。
3. 向吸附柱RA中加入350μL去蛋白液RW1,12,000rpm 离心30秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
4. 向吸附柱RA中央加入50μL 的DNase I工作液,室温(20-30℃)放置15分钟。
注:直接将DNase I工作液滴在膜中央部位,不要让工作液滴在O型圈或是离心柱管壁上。
5. 向吸附柱RA中加入350μL去蛋白液RW1,12,000 rpm 离心30-60秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
6. 接漂洗液RW步骤等后续步骤操作。如果是其它公司试剂盒,则接最后的一个漂洗液漂洗等后续步骤操作。
品牌: | 爱普科学 |
英文名称: | AipPure DNase I Upper Column Digestion Kit(RNase-free) |
规格: | 50T |
性状: | 液体 |
储存温度: | RT |
保质期: | 12个月 |
产品说明: | 收到产品后,请尽快按照试剂盒内各组分的储存温度保存! |
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