产品储存：冰块运输，-20℃保存，保质期2年，室温存放一周，无明显活性改变。

产品浓度：0.1U/µL

产品介绍：

    本制品包含LongTaq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液，浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。可用于长片段DNA扩增和GC含量高，二级结构丰富的片段扩增。

    本制品使用方便快捷，能避免PCR操作过程中的污染，使用时只需取适量2× LongTaq PCR MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去离子水补足体积，使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀，操作需在冰上进行。

染料说明：本制品不含染料。

产品组成：LongTaq DNA Polymerase (Recombinant)：0.1units/µL；MgCl2：4mM；dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP)：0.4mM。

质量控制：经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余DNA；能有效地扩增人基因中的单拷贝基因。

适用范围：本制品适合扩增长度≤10kb。

反应举例：(以下举例仅供参考)

1. 用AipMix 2× LongTaq PCR MasterMix制品，以人基因组DNA为模板，扩增1kb的片段，反应体系为50µL(如反应体系不同，可按此比例增加或减少用量)。

注：为了获得更好的扩增特异性，建议在冰上配制反应液。使用时将所有的溶液收集至离心管底部，然后再进行使用，减少损失；使用时应轻柔混匀(避免起泡)，缓慢吸取。

2. PCR反应循环的设置：(以三步法PCR扩增为例)

注：实际PCR反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据实际情况，设定最佳反应条件。

3. 结果检测：反应结束后，取5µL反应产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。如果是含染料Mix扩增的产物，可以不用加上样缓冲液，直接上样电泳即可。

注意事项：

1. 扩增长片段强烈推荐使用0.2μL薄壁管。其他试管未经测试。较厚的试管在92℃时不能有效地使模板变性。变性时，尽可能缩短变性时间，降低变性温度。第一步变性在92~94℃下进行2分钟(GC含量高可延长时间达5分钟)。长片段在循环过程中尽可能缩短变性时间(92~94℃下进行10-15秒)，除非模板中富含GC，则95℃下变性30秒。这可以防止DNA脱嘌呤和链断裂，对于所需扩增的基因组DNA片段终长度超过12 kb时，应该尽可能的降低变性温度和时间。变性需要的时间在不同的PCR仪器上稍有不同。

2. 如果扩增模板GC含量高或者扩增片段比较长，可在反应混合物中加入甜菜碱或者DMSO，甜菜碱终浓度1-2.5M；DMSO到终浓度1%-8%，最常用2％(<30kb)或者4％(>30kb)往往会改善扩增效果。

3. 扩增长片段，引物一般终浓度为0.3-1μM，长度最好为27-36 bp；退火温度一般在65-70℃，此时退火温度和延伸温度基本一致，可将退火和延伸在同一个温度进行，使用2步扩增法。当然如果设计的引物在20 bp左右，则还是建议使用传统3步扩增法为好。

产品说明书.pdf